PERWARNAAN GRAM
Membezakan bacteria jenis gram positif dan bacteria jenis gram negative.
Prosedur
1. Apusan di lakukan
2. Kristal violet selama 1 minit
3. Basuh dengan air pili
4. Iodine lugol selama 1 minit
5. Basuh dengan air pili
6. Bilas dengan aseton selama 3-5 saat
7. Basuh dengan air pili
8. Safranin selama 1 minit
Keputusan
| Positif | Negetif |
| biru-ungu | merah - pink |
Pewarnaan Ziehl – Neelsen ( Pewarnaan Tahan Asid ).
Ujikaji ini dijalankan bagi mengesan antara bakteria tahan asid dan bakteria tidak tahan asid.
Prosedur
1. Apusan bakteria dibuat pada slaid, dikeringkan di udara dan apusan difiksasikan.
2. Banjirkan dengan pewarna karbon fuksin Ziehl – Neelsen.
3. Slaid dipanaskan dengan api pembakaran kain kasa yang dibasahi alkohol. Proses ini dilakukan sehingga wap keluar dari apusan selama 5 – 10 minit. ( Pastikan pewarna tidak mendidih atau menjadi kering ).
4. Apusan dibiarkan sejuk dan dicucikan dengan air.
5. Alkohol asid ditambahkan selama 25 – 30 saat.
6. Cucikan dengan air.
7. Banjir dengan metilena biru selama 30 saat.
8. Apusan dicucikan dan dikeringkan dengan kertas turas.
Keputusan
| Positif ( bakteria tahan asid ) | Negetif ( bakteria tak tahan asid ) |
| Sel bakteria berwarna merah | sel bakteria berwarna biru kehijauan |
Pewarnaan kapsul atau pewarnaan negatif
Pewarnaan Dakwat India
Menunjukkan kehadiran kapsul bakteria.
Kaedah
1. Apusan dibuat.
2. Apusan dicampur dengan baik dengan satu loop dakwat india
3. Campuran ditutup dengan kaca penutup.
4. Slaid diamati di bawah mikroskop ( X 100 ).
Keputusan
| Positif | Negatif |
| Kapsul = lutsinar Bakteria & latar belakang = hitam gelap | Kapsul = tiada kapsul lutsinar Bakteria & latar belakang = hitam gelap |
Pewarnaan granul metakromatin
3 jenis pencelupan iaitu Albert, Pung dan Neissers
Pewarnaan Albert
Menunjukkan kehadiran granul metakromatin atau volutin yang terdapat pada sesetengah bakteria melalui pewarnaan.
KAEDAH :
1. Apusan dibuat.
2. Apusan diliputi dengan pewarnaan Albert ( 5 minit)
3. Slaid dicuci dengan air pili.
4. Liputikan dengan iodin Gram ( 1 minit )
5. Dicucikan dan dikeringkan
Keputusan
| Positif | Negatif |
| Granul (bintik-bintik) warna biru kehitaman dalam sitoplasma | Tiada granul dan sitoplasma warna hijau |
Pewarnaan spora atau scheaffer fulton
Pewarnaan Schaeffer – Fulton
Memperkenalkan tatacara pewarnaan spora dan menentukan kedudukan lokasi spora di dalam sel bakteria.
KAEDAH :
1. Apusan bakteria dibuat.
2. Liputikan dengan malacite hijau 5 %.
3. Slaid dipanaskan sehingga keluar wap beberapa kali tetapi jangan sampai mendidih ( tambah pewarna jika mengalami kekeringan ).
4. Biarkan selama 1 minit.
5. Apusan dicucikan dengan air pili
6. Liputkan dengan karbon fuschin cair atau safranin selama 30 saat.
7. Apusan dicucikan dengan air pili
8. Keringkan dengan kertas penyerap.
Keputusan
| Positif | Negatif |
| Butir spora di dalam @ luar sel bakteria warna hijau dan bakteria warna merah | Bakteria warna merah |
